Геномна бібліотека проти кДНК-бібліотеки

Автор: Laura McKinney
Дата Створення: 6 Квітень 2021
Дата Оновлення: 11 Травень 2024
Anonim
Клонирование ДНК и рекомбинантная ДНК (видео 4) | Генная инженерия | Молекулярная генетика
Відеоролик: Клонирование ДНК и рекомбинантная ДНК (видео 4) | Генная инженерия | Молекулярная генетика

Зміст

Геномна бібліотека та бібліотека кДНК використовуються при клонуванні генів для виділення різних ДНК. Різниця між обома цими бібліотеками полягає в тому, що геномна бібліотека містить фрагменти ДНК, які експресують весь геном організму, тоді як в бібліотеці кДНК мРНК береться з конкретних клітин організму, а потім кДНК складається з цієї мРНК в реакції, що каталізується. ферментом.


Зміст: Різниця між геномною бібліотекою та бібліотекою кДНК

  • Порівняльна діаграма
  • Що таке геномна бібліотека?
  • Що таке бібліотека кДНК?
  • Основні відмінності

Порівняльна діаграма

ОсноваГеномна бібліотекакДНК бібліотека
ВизначенняГеномна бібліотека - це сукупність повної геномної ДНК від одного організму. ДНК зберігається в популяції подібних векторів, кожен з яких містить окрему вставку ДНК.Бібліотека кДНК - це суміш клонованих фрагментів кДНК, вставлених у добірку клітин-господарів, яка в сукупності складає деяку частину транскрипту організму.
ВиразЦілий геномТільки специфічні гени.
РозмірБільшийМенший
ІнтрониПоточнийВідсутні
ВекторВін використовує плазміди, космід, лямбда-фаг, YAC і BAC для розміщення великих фрагментів.Це не інтрони, тому для розміщення скромних фрагментів використовують плазміди, фагеміди, лямбда-фаг.

Що таке геномна бібліотека?

При процедурі клонування генів цікавий ген копіюється з виділеної з організму ДНК. Коли ДНК відокремлюється від організму, її гени були вилучені за один раз. ДНК організму включає тисячі різних генів. Генетичний інженер знаходить один конкретний ген, який кодує конкретний білок, який цікавить.


Не існує абсолютно жодного методу, за допомогою якого певний ген доступний з ДНК, тому вчені роблять бібліотеки генів для каталогізації ДНК організму. Вчені потім вибирають потрібний ген у бібліотеці. Генна бібліотека - це група живих бактерій, що трансформуються унікальними шматочками ДНК в організмі, що є походженням бажаного гена. ДНК витягується з організму, щоб створити бібліотеку, що є організованою формою ДНК. Геномна бібліотека та кДНК - це два види бібліотек генів. Численні методи клонування генів використовувались як генні стратегії в рекомбінантній технології.

Фрагменти ДНК відокремлюють шляхом вирізання специфічними рестрикційними ферментами з материнської ДНК. Ці фрагменти зв'язуються з векторними молекулами, і накопичені молекули переміщуються в клітини господаря, по 1 молекулі в кожній клітині. Геномна бібліотека складається з інтронів, небажаної ДНК та ряду інших фрагментів. У межах цієї бібліотеки ДНК розбивається на більш дрібні фрагменти всередині клітини. Після цього всі дрібні частини вставляються у вектор для створення бібліотеки. Геномна бібліотека включає всю ДНК цілих генів, а клітина складається з усіх їх інтронів. Геномна ДНК - це переклад всього геному. Він не кодує всю частину на одному кодоні через розмір інтронів. Не існує жодного механізму сплайсингу в геномній бібліотеці, який би викликав труднощі в експресії генів, узятих з цієї бібліотеки.


Що таке бібліотека кДНК?

кДНК бібліотека будується шляхом вибору однієї тканини або типу клітин. Згодом мРНК виділяється з цієї тканини або клітини. Копія ДНК молекули мРНК складається із специфічного ферменту зворотної транскриптази. Отже, бібліотека кДНК містить ту специфічну ДНК, яка присутня в мРНК. В цій бібліотеці не знайдено інтронів і послідовностей ДНК. У цій бібліотеці всі клони повнорозмірні. Крім того, клон кДНК є необхідним для трансфекції клітин для отримання білка або для аналізу на основі клітин.

Основні відмінності

  1. Геномна бібліотека була написана безпосередньо з геномної ДНК.
  2. КДНК бібліотека була сформована за допомогою мРНК як шаблону.
  3. Геномна бібліотека займає весь геном цього організму.
  4. кДНК бібліотека представляє лише гени конкретних недуг.
  5. Два ферменти, рестрикційні ендонуклеази та лігази важливі для побудови геномної бібліотеки.
  6. Фермент зворотної транскриптази відіграє значну роль у побудові бібліотеки кДНК.
  7. Геномна бібліотека займає ДНК як прокаріотичних, так і еукаріотичних організмів.
  8. кДНК бібліотека представляє ДНК просто еукаріотичних організмів.
  9. КДНК бібліотека здатна до експресії геному бактерій, які є прокаріотичними, оскільки їм не вистачає інтронів.
  10. Геномна бібліотека не здатна говорити в організмі прокаріотів, оскільки вони мають інтрони, а прокаріотичний організм не має жодної машини для обробки інтронів.